На ежегодном Конгрессе гепатологов США в Бостоне в ноябре этого года были доложены результаты совместного исследования ученых из Китая и Миннесоты (США) возможности применить методики редактирования генов гепатита В для снижения секреции HBsAg. Снижение синтеза поверхностного антигена гепатита В является важным, поскольку HBsAgпрепятствует иммунной системе элиминировать вирус. Команда исследователей использовала средство редактирования CRISPR (короткие палиндромные повторы, регулярно расположенные группами), названный CRISPR-STOP, для процедуры редактирования генов.
Идея состоит в том, что CRISPR-STOP может быть столь же эффективным, как стандартное редактирование CRISPR, но безопаснее. Стандартный подход CRISPR-Cas9 требует двухцепочечного разрыва в геноме, и проблема в том, что если в геноме человека происходит более одного двухцепочечного разрыва одновременно, появляется вероятность того, что разные части разных хромосом могут объединиться неверным образом и вызвать проблемы. Вместо создания двухцепочечного разрыва CRISPR-STOP использует редактор оснований для химической модификации ДНК от одного основания к другому и введения стоп-кодона в последовательность гена-мишени, эффективно ограничивая способность гена-мишени продуцировать белок. Этот способ эффективного выключения гена представляется надежным и безопасным.
При использовании метода редактирования генов (в клеточной культуре) 71% клеток печени, которые экспрессировали основной редактор, получили желаемый стоп-кодон в целевом гене.
Секреция поверхностного антигена вируса гепатита В с помощью метода редактирования генов была снижена на 92%. Исследователи сообщают о высокой степени консервативности генотипов гепатита B (B, C, F и H). В частности, 94% последовательности гена S было консервативно для генотипа B, 92% — для генотипа C, 91% — для генотипа F и 71% -для генотипа H.
К сожалению, ген S, кодирующий синтез HBsAg, — не единственная ДНК HBV, которая интегрирована в геном хозяина. Для полной очистки гепатоцитов от генов вируса понадобится более широкий подход. Данное сообщение является первым случаем применения генетического редактирования CRISPR в модели гепатита В.
The Liver Meeting 2019: American Association for the Study of Liver Diseases (AASLD): Abstract 86. Presented November 10, 2019
Автор: В. Е. Сюткин, д.м.н., профессор кафедры хирургии с курсами онкологии, анестезиологии и реаниматологии, эндоскопии, хирургической патологии, клинической трансплантологии и органного донорства ИППО ФГБУ «ГНЦ РФ – ФМБЦ им. А.И. Бурназяна», в.н.с. Московского Центра трансплантации печени НИИ скорой помощи им. Н.В. Склифосовского
14 ноября 2019